BspQI
Ang BspQI mahimong recombinantly nga gipahayag sa E. coli nga makaila sa piho nga mga dapit ug gihimo ubos sa
Ang BspQI, usa ka IIs restriction endonuclease restriction endonuclease, nakuha gikan sa usa ka recombinant E. coli strain nga nagdala sa clone ug giusab nga BspQI gen gikan sa Bacillus sphaericus.Makaila kini sa piho nga mga site, ug ang pagkasunod-sunod sa pag-ila ug mga cleavage site mao ang mosunod:
5' · · · · GCTCTTC(N) · · · · · · · · · · · · 3'
3' · · · · CGAGAAG(NNNN) · · · · 5'
Mga Feature sa Produkto
1. Taas nga kalihokan, Paspas nga paghilis;
2. Ubos nga kalihokan sa bituon, pagsiguro sa tukma nga pagputol sama sa "scalpel";
3. Kung walay BSA ug libre nga gigikanan sa hayop;
Pagkasensitibo sa Methylation
Dako methylation:Dili Sensitibo;
Dcm methylation:Dili Sensitibo;
CpG Methylation:Dili Sensitibo;
Mga kahimtang sa pagtipig
Ang produkto kinahanglan ipadala ≤ 0 ℃;Tipigi sa -25~- 15 ℃ kahimtang.
Pagtipig buffer
20mM Tris-HCl, 0.1mM EDTA, 500mM KCl, 1.0mM dithiothreitol, 500 µg/ml Recombinant Albumin, 0. 1% Trition X- 100 ug 50% glycerol (pH 7.0 @ 25°C).
Kahubitan sa Yunit
Ang usa ka yunit gihubit ingon ang gidaghanon sa enzyme nga gikinahanglan aron matunaw ang 1µg sa Internal nga kontrol nga DNA sa 1 ka oras sa 50°C sa kinatibuk-ang gidaghanon sa reaksyon nga 50 µL.
Pagkontrol sa Kalidad
Protein Purity Assay (SDS-PAGE):Ang kaputli sa BspQI kay ≥95% gitino sa SDS-PAGE analysis.
RNase:Ang 10U sa BspQI nga adunay 1.6μg MS2 RNA sulod sa 4 ka oras sa 50 ℃ wala maghatag ug degradasyon nga gitino sa agarose gel electrophoresis.
Non-Specific nga DNase nga Kalihokan:Ang 10U sa BspQI nga adunay 1μg λ DNA sa 50 ℃ sulod sa 16 ka oras, kon itandi sa 50 ℃ sulod sa 1 ka oras, dili makahatag ug sobra nga DNA nga gitino sa agarose gel electrophoresis.
Ligation ug Recutting:Human sa paghilis sa 1 μg λDNA nga adunay 10U BspQI, ang mga tipik sa DNA mahimong lig-on sa T4 DNA ligase sa 16ºC.Ug kini nga mga ligid nga mga tipik mahimong maputol pinaagi sa BspQI.
E. coli DNA: Ang E. coli 16s rDNA-specific TaqMan qPCR detection nagpakita nga ang E.coli genome residue ≤ 0.1pg/ul.
Ang nahabilin nga protina sa host:≤ 50 ppm
Bakterya Endotoxin: LAL-test, sumala sa Chinese Pharmacopoeia IV 2020 nga edisyon, gel limit test method, general rule (1143).Ang sulod sa bacterial endotoxin kinahanglan nga ≤10 EU/mg.
Sistema sa reaksyon ug kondisyon
| Component | Tomo |
| BspQ I(10 U/μL) | 1 μL |
| DNA | 1 ug g |
| 10 x BspQ I Buffer | 5 μL |
| dd H2O | Hangtod sa 50 μL |
Kondisyon sa reaksyon: 50 ℃, 1~ 16 ka oras.
Dili aktibo sa kainit: 80°C sulod sa 20 min.
Ang girekomendar nga sistema sa reaksyon ug mga kondisyon makahatag ug medyo maayo nga epekto sa pagtunaw sa enzyme, nga alang sa pakisayran lamang, palihug tan-awa ang mga resulta sa eksperimento alang sa mga detalye.
Aplikasyon sa produkto
Pagdili sa pagtunaw sa endonuclease, Rapid cloning.
Mga nota
1. Ang gidaghanon sa enzyme ≤ 1/10 sa gidaghanon sa reaksyon.
2. Ang kalihokan sa bituon mahimong mahitabo kung ang konsentrasyon sa gliserol labaw sa 5%.
3. Ang kalihokan sa cleavage mahimong mahitabo kung ang Substrate ubos sa girekomendar nga ratio.
