Ultra Nuclease
Ang UltraNuclease usa ka genetically engineeredendonuclaese nga nakuha gikan sa Serratia marcescens, nga makahimo sa pag-degrade sa DNA o RNA, doble o single stranded, linear o circular ubos sa usa ka halapad nga kondisyon, hingpit nga degrade ang nucleic acid ngadto sa 5'-monophosphate oligonucleotides nga adunay 3-5base nga gitas-on .Pagkahuman sa pagbag-o sa genetic engineering, ang produkto gi-ferment, gipahayag, ug giputli sa Escherichia coli (E. coli), nga nagpamenos sa kalapot sa cell supernatant ug cell lysate inscientific nga panukiduki, apan nagpauswag usab sa kahusayan sa pagputli ug pag-andar sa panukiduki sa protina.Mahimo usab kini gamiton sa gene therapy, pagputli sa virus, paghimo sa bakuna, protina ug polysaccharide pharmaceutical nga industriya isip host residue nucleic acid reagent reagent.
Mga bahin sa produkto
CAS No. | 9025-65-4 |
EC No. | |
Molekular nga Timbang | 30kDa |
Isoelektrik nga Punto | 6.85 |
Kaputli sa Protina | ≥99%( SDS-PAGE UG SEC-HPLC) |
Piho nga Kalihokan | ≥1.1×106U/mg |
Labing maayo nga Temperatura | 37°C |
Labing maayo nga pH | 8.0 |
Kalihokan sa Protease | negatibo |
Bioburden | <10CFU/100,000U |
Nabilin nga Host-cell Protein | ≤10ppm |
Bug-at nga Metal | ≤10ppm |
Bakterya nga Endotoxin | <0.25EU/1000U |
Pagtipig Buffer | 20mM Tris-HCl, pH 8.0, 2mM MgCl2 , 20mM NaCl, 50% Glycerol |
Mga kahimtang sa pagtipig
≤0°C transportasyon;-25~-15°C Pagtipig, 2 ka tuig nga balido (likayan ang pagyelo-pagtunaw).
Kahubitan sa Yunit
Ang gidaghanon sa enzyme nga gigamit sa pag-usab sa pagsuyup bili sa △A260 sa 1.0 sulod sa 30min sa 37 °C, pH 8.0, katumbas sa digested 37μg salmon sperm DNA pinaagi sa pagputol ngadto sa oligonucleotides, gihubit ingon nga usa ka aktibo nga yunit(U).
Pagkontrol sa kalidad
Nabilin nga Host-cell Protein: ELISA kit
•Protease Mga salin: 250KU/mL UltraNuclease reacted uban sa substrate alang sa 60min, walay kalihokan nga nakita.
•Bakterya nga Endotoxin: LAL-Test, Pharmacopoeia of the People's Republic of China Volume 4 (2020 Edition) gel limit test method.Kinatibuk-ang mga Lagda (1143).
•Bioburden: Pharmacopoeia sa People's Republic of China Tomo 4 (2020 nga Edisyon)— Kinatibuk-an
Mga Lagda alang sa Pagsulay sa Sterility (1101), PRC National Standard, GB 4789.2-2016.
•Bug-at nga Metal:ICP-AES, HJ776-2015.
Operasyon
Ang kalihokan sa UltraNuclease labi nga napugngan kung ang konsentrasyon sa SDS labaw sa 0.1% o EDTA
Ang konsentrasyon labaw sa 1mM. Ang Surfactant Triton X-100, Tween 20 ug Tween 80 walay epekto sa nuclease
mga kabtangan kung ang konsentrasyon ubos sa 1.5%.
Operasyon | Optimal nga Operasyon | Balido nga Operasyon |
Temperatura | 37 ℃ | 0-45 ℃ |
pH | 8.0-9.2 | 6.0- 11.0 |
Mg2+ | 1-2mM | 1- 15mM |
DTT | 0- 100mM | >100mM |
2-Mercaptoethanol | 0- 100mM | >100mM |
Monovalent nga metal ion (Na+, K+ ug uban pa) | 0-20mM | 0-200mM |
PO43- | 0-10mM | 0- 100mM |
Paggamit ug Dosis
• Kuhaa ang exogenous nucleic acid gikan sa mga produkto sa bakuna, pagpakunhod sa risgo sa nahabilin nga nucleic acid toxicity ug pagpalambo sa kaluwasan sa produkto.
• Pagpakunhod sa viscosity sa feed liquid tungod sa nucleic acid, pagpamubo sa panahon sa pagproseso ug sa pagdugang sa protina nga abot.
• Kuhaa ang nucleic acid nga nagputos sa partikulo (virus, inclusion body, ug uban pa), nga makaayo
sa pagpagawas ug pagputli sa partikulo.
Eksperimental nga Uri | Pagprodyus sa Protina | Virus, Bakuna | Mga Cell nga Droga |
Numero sa mga Cell | 1g cell basa nga gibug-aton (gisuspinde sa 10ml buffer) | 1L nga fermentation likido nga supernatant | 1L kultura |
Minimum nga Dosis | 250U | 100U | 100U |
Girekomenda nga Dosis | 2500U | 25000U | 5000U |
• Ang pagtambal sa nuclease makapauswag sa resolusyon ug pagbawi sa sample alang sa column chromatography, electrophoresis ug blotting analysis.
• Sa gene therapy, ang nucleic acid gikuha aron makakuha og purified adeno-associated virus.