2×PCR Super Mix (uban ang Tina)
Ang 2 × PCR Master Mix adunay Taq DNA Polymerase, dNTPs, ug uban pang mga sangkap nga gikinahanglan sa PCR.Ang Master Mix lig-on sulod sa 3 ka bulan sa 4 ℃ uban sa among customized stabilizers.Ang pre-mix nga solusyon gi-optimize alang sa naandan nga PCR ug andam nga gamiton pinaagi sa pagdugang sa DNA template ug mga primer.Ang mga produkto sa PCR mahimong direktang ikarga para sa electrophoresis nga adunay pre-loaded nga bromophenol blue nga tina.Ang gipadako nga mga produkto adunay 3'-dA protrusion ug dali nga ma-clone sa T vector.Ang 2×PCR Master Mix nagpasimple sa pamaagi sa PCR ug makapamenos sa kontaminasyon.
Mga Kondisyon sa Pagtipig
Ang mga produkto kinahanglan nga tipigan sa -25 ℃ ~ -15 ℃ sulod sa 2 ka tuig.
Mga detalye
| Pagkamatinud-anon(vs.Taq) | 1 × |
| Init nga Pagsugod | No |
| Overhang | 3 '-A |
| Polymerase | Taq DNA Polymerase |
| Format sa Reaksyon | SuperMix o Master Mix |
| Bilis sa Reaksyon | Estandard |
| Uri sa Produkto | PCR Master Mix (2x) |
Mga instruksyon
1.Sistema sa Reaksyon
| Mga sangkap | Tomo(μL) |
| Template DNA | Angay |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| 2 × PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | ngadto sa 50 |
2.Amplification Protocol
| Mga lakang sa siklo | Temperatura (°C) | Panahon | Mga siklo |
| Inisyal nga denaturation | 94 | 5 min | 1 |
| Denaturasyon | 94 | 30 ka seg | 35 |
| Pag-ani | 50-60 | 30 ka seg | |
| Extension | 72 | 30-60 ka seg/kb | |
| Katapusan nga extension | 72 | 10 min | 1 |
Mubo nga sulat:
1) Paggamit sa template: 50-200ng genomic DNA;0.1-10ng plasmid DNA.
2) Mg2+konsentrasyon: Kini nga produkto adunay 3mM nga MgCl2, nga angay alang sa kadaghanan sa mga reaksyon sa PCR.
3) Temperatura sa pag-ani: Palihug tan-awa ang teoretikal nga Tm nga kantidad sa mga primer.Ang temperatura sa annealing mahimong ibutang sa 2-5 ℃ nga mas ubos kaysa sa teoretikal nga kantidad sa primer.
4) Panahon sa pagpalawig: Alang sa pag-ila sa molekula, girekomenda ang 30 sec/kb.Para sa gene cloning, girekomendar ang 60 sec/kb.
Mga nota
1.Ang mga produkto sa PCR nga adunay 2 × PCR Master Mix dili angay alang sa polyacrylamide gel electrophoresis.
2.Para sa imong kaluwasan ug panglawas, palihog pagsul-ob ug lab coat ug disposable gloves para sa operasyon.
3.Gigamit kini alang sa paggamit sa panukiduki LAMANG!
