Usa ka Lakang nga Dali nga RT-qPCR Probe Premix-UNG
Iring No: HCR5143A
Ang Usa ka Lakang nga RT-qPCR Probe Kit (ALANG SA KADAYON) usa ka RT-qPCR nga paspas nga detection kit nga gibase sa probe nga angay alang sa single-plex o multiplex quantitative PCR gamit ang RNA isip template (sama sa RNA virus).Ang kini nga produkto naggamit sa usa ka bag-ong henerasyon sa Taq DNA Polymerase nga gibag-o sa antibody ug usa ka lakang nga gipahinungod nga Reverse Transcriptase, nga adunay usa ka na-optimize nga buffer alang sa paspas nga pagpadako, nga adunay mas paspas nga tulin sa pagpadako, mas taas nga kahusayan sa amplification ug espesipiko.Gisuportahan niini ang balanse nga pagpadako sa parehas nga single-plex ug multiplex sa mga sample nga ubos ug taas nga konsentrasyon sa mubo nga panahon.
Mga sangkap
1. 5×RT-qPCR buffer (U+)
2. Enzyme mix (U+)
Mubo nga sulat:
a.5×RT-qPCR buffer (U+) naglakip sa dNTP ug Mg2+;
b.Ang enzyme mix (U+) naglakip sa reverse transcriptase, Hot Start Taq DNA polymerase, RNase inhibitor ug UDG;
c.Gamit ug RNase-Free tips, EP tubes, etc.
Sa dili pa gamiton, isagol pag-ayo ang 5×RT-qPCR buffer (U+).Kung adunay bisan unsang ulan pagkahuman sa pagtunaw, hulata nga ang buffer mobalik sa temperatura sa kwarto, isagol ug matunaw, ug dayon gamiton kini sa normal.
Mga Kondisyon sa Pagtipig
Ang produkto gipadala uban ang uga nga yelo ug mahimong tipigan sa -25~-15 ℃ sulod sa 1 ka tuig.
Mga instruksyon
1. Reaksyon Sistema
| Mga sangkap | Dami (20 μL reaksyon) |
| 2 ×RT-qPCR buffer | 4μL |
| Pagsagol sa enzyme (U+) | 0.8μL |
| Primer Sa unahan | 0.1~ 1.0μM |
| Balikbalik nga Primer | 0.1~ 1.0μM |
| TaqMan Probe | 0.05~0.25μM |
| Template | X μL |
| RNase-Free nga Tubig | hangtod sa 25μL |
Mubo nga sulat: Ang gidaghanon sa reaksyon mao ang 10-50μL.
2. Cycling Protocol (Standard)
| Siklo lakang | Temp. | Panahon | Mga siklo |
| Baliktad nga Transkripsyon | 55 ℃ | 10 min | 1 |
| Inisyal nga Denaturasyon | 95 ℃ | 30 ka seg | 1 |
| Denaturasyon | 95 ℃ | 10 ka seg | 45 |
| Pag-ani/Pagdugang | 60 ℃ | 30 ka seg |
| Protocol sa Pagbisikleta (Pagpuasa) Siklo lakang |
Temp. |
Panahon |
Mga siklo |
| Baliktad nga Transkripsyon | 55 ℃ | 5 min | 1 |
| Inisyal nga Denaturasyon | 95 ℃ | 5 s | 1 |
| Denaturasyon | 95 ℃ | 3 s | 43 |
| Pag-ani/Pagdugang | 60 ℃ | 10 s |
Mubo nga sulat:
a.Ang reverse transcription nga temperatura anaa sa taliwala sa 50 ℃ ngadto sa 60 ℃, ang pagdugang sa temperatura makatabang sa pagpadako sa komplikadong mga istruktura ug taas nga CG content templates;
b.Ang labing maayo nga temperatura sa annealing kinahanglang i-adjust base sa Tm value sa primer, ug pilia ang pinakamubo nga panahon para sa fluorescence signal collection base sa Real Time PCR instrument.
Mga nota
Palihug pagsul-ob sa gikinahanglan nga PPE, ingon nga lab coat ug gwantes, aron masiguro ang imong kahimsog ug kaluwasan!
