5×Neoscript Fast RT-qPCR Premix plus-UNG

Iring No: HCB5142A

Ang Neoscript Fast RT Premix-UNG (Probe qRT-PCR) usa ka lig-on nga one-tube probe-based mix nga angay alang sa usa ka lakang nga reverse transcription ug quantitative PCR (qRT-PCR).Gisuportahan niini ang pre-mixing sa mga primer ug probes ug magpabilin nga lig-on human sa dugay nga pagtipig sa ubos nga temperatura.Ang sample nga sulayan mahimong idugang direkta kung gamiton, nga wala’y dugang nga pag-abli sa tubo / pipetting nga operasyon.Kini nga produkto naghatag og mga sangkap, pananglitan sa init nga pagsugod sa DNA polymerase, M-MLV, heat-labile uracil DNA glycosylase (TS-UNG), RNase Inhibitor, MgCl₂, mga dNTP (nga adunay dUTP imbes nga dTTP), ug mga stabilizer.Uban sa genetically modified rapid amplification reverse transcriptase ug DNA polymerase, posible nga makompleto ang PCR amplification sulod sa 20-40 minutos.Kini nga reagent naggamit ug espesyal nga buffer para sa qPCR nga adunay sinagol nga mga enzyme sa anti-inhibitory amplification enzyme ug UNG enzyme.Busa, makakuha kini og maayo nga pagpadako sa mga target nga gene ug mapugngan ang sayup nga pagpadako tungod sa nahabilin nga PCR ug polusyon sa aerosol.Kini nga reagent nahiuyon sa kadaghanan sa fluorescence quantitative PCR nga mga instrumento gikan sa mga tiggama sama sa Applied Biosystems, Eppendorf, Bio-Rad ug Roche.

Component

1.25×Neoscript Fast RTase/UNG Mix

2.5×Neoscript Fast RT Premix Buffer (dUTP)

Mga Kondisyon sa Pagtipig

Ang tanan nga mga sangkap kinahanglan ibutang sa -20 ℃ alang sa dugay nga pagtipig ug 4 ℃ hangtod sa 3 ka bulan.Palihug isagol pag-ayo pagkahuman sa pagtunaw ug pag-centrifuge sa dili pa gamiton.Likayi ang kanunay nga freeze-thaw.

Pagpangandam sa Sistema sa Reaksyon sa qRT-PCR

1) a.Ang katapusan nga konsentrasyon sa primer kasagaran 0.2μM.Alang sa mas maayo nga mga resulta, ang primer nga konsentrasyon mahimong ma-optimize sulod sa han-ay sa 0.2-1μM.Kasagaran, ang probe konsentrasyon mahimong optimized sa sulod sa han-ay sa 0.1-0.3μM.

2) b. Kung mogamit ug paspas nga PCR Procedure, ang pagdugang sa konsentrasyon sa mga primer ug probes mahimong moresulta sa mas maayo nga mga resulta sa amplification, ug ang ilang ratio kinahanglan nga ma-optimize sumala niana.

3) Lain-laing mga matang sa mga sample adunay lain-laing mga matang ug sulod sa inhibitor ug kopya gidaghanon sa target gene.Ang gidaghanon sa sample kinahanglan nga tagdon sa aktuwal nga kahimtang.Paghimo og dilution sa sample gamit ang nuclease-free nga tubig o TE Buffer, kung gikinahanglan.

Reaksyon Cmga kondisyon

Pagkontrol sa Kalidad

1.Function detection: sensitivity, specificity ug repeatability sa qPCR.

2.Walay exogenous nuclease nga kalihokan: walay exogenous endonuclease ug exonuclease polusyon.

Mga nota

1.Ang rate sa pagpadako sa paspas nga DNA polymerase dili moubos sa 1kb/10s.Lainlaing mga instrumento sa PCR adunay lain-laing katulin sa pagpainit ug pagpabugnaw, mga paagi sa pagkontrol sa temperatura ug thermal conductivity, ug busa ang pag-optimize sa imong primer/probe nga konsentrasyon ug pamaagi sa pagpadagan inubanan sa imong espesipikong paspas nga instrumento sa PCR importante.

2.Kini nga produkto naghimo sa halapad nga paggamit, ug kini angay alang sa high-sensitivity nga molekular nga diagnosis.Girekomenda ang tulo ka lakang nga pamaagi sa PCR alang sa mga primer nga adunay ubos nga temperatura sa annealing o alang sa pagpadako sa taas nga mga tipik nga sobra sa 200 bp.

3.Tungod kay ang lainlaing mga amplicon adunay lainlaing kahusayan sa paggamit sa dUTP ug lainlain nga pagkasensitibo sa UNG, ang mga reagents kinahanglan nga ma-optimize kung ang pagkasensitibo sa detection mikunhod kung gigamit ang sistema sa UNG.Palihug kontaka kami alang sa teknikal nga suporta kung gikinahanglan.

4.Aron malikayan ang pagpadako sa mga produkto sa pagdala sa PCR, gikinahanglan ang gipahinungod nga lugar sa eksperimento ug pipette alang sa pagpadako.Pag-opera gamit ang mga gwantis ug pag-ilis kanunay ug ayaw ablihi ang PCR tube human sa amplification.