Ultra Nuclease GMP-grado
Iring No: HC2016A
Ang UltraNuclease GMP-grade gipahayag ug giputli sa Escherichia coli (E.coli) pinaagi sa genetically engineered ug giandam ubos sa GMP environment.Kini makapakunhod sa viscosity sa cell supernatant ug cell lysate sa siyentipikanhong panukiduki, sa pagdugang sa protina pagputli efficiency ug pagpalambo sa protina functional research.Ang produkto mahimo usab nga makunhuran ang host nucleic acid residues ngadto sa pg-grade, pagpausbaw sa performance ug kaluwasan sa biolohikal nga mga produkto sa mga aplikasyon lakip na ang pagputli sa virus, paggama sa bakuna, ug paggama og protina/polisakarida nga parmasyutiko.Gawas pa, ang produkto mahimo usab nga magamit aron mapugngan ang pagkumpol sa mga selula sa mononukleyar nga dugo sa peripheral sa tawo (PBMC) sa therapy sa selula ug pagpalambo sa bakuna.
Gihatag ang UltraNuclease sa porma sa usa ka sterilized reagent, gi-eluted sa buffer (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin), nga adunay dagway sa usa ka walay kolor, transparent nga likido.Kini nga produkto gihimo sa mga kinahanglanon sa proseso sa GMP ug gihatag sa usa ka likido nga porma.
Mga sangkap
UltraNuclease GMP-grade (250 U/μL)
Mga Kondisyon sa Pagtipig
Ang produkto gipadala uban sa uga nga yelo ug mahimong tipigan sa -25 ℃ ~ -15 ° C sulod sa duha ka tuig.
Kung ang produkto giablihan ug gitipigan sa 4 ℃ sobra sa usa ka semana, among girekomenda ang pagsalaang produkto aron malikayan ang kontaminasyon sa microbial.
Mga detalye
| Expression Host | Recombinant E. coli nga adunay UltraNuclease gene |
| Molekular nga Timbang | 26.5 kDa |
| soelectric nga punto | 6.85 |
| Kaputli | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Pagtipig Buffer | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin |
|
Kahubitan sa Yunit | Ang kahulugan sa usa ka Activity unit (U) mao ang gidaghanon sa enzyme nga gigamit sausba ang kantidad sa pagsuyup sa ΔA260 sa 1.0 sa 30 minuto sa usa ka 2. 625 mLsistema sa reaksyon sa 37 ℃ nga adunay pH nga 8.0 (katumbas sa kompleto nga paghilis sa37 μg salmon sperm DNA ngadto sa oligonucleotides). |
Mga instruksyon
1. Sampol Koleksyon
Adherent cells: kuhaa ang medium, hugasi ang mga cell gamit ang PBS, ug kuhaa ang supernatant.
Suspension cells: kolektahon ang mga cell pinaagi sa centrifugation, hugasan ang mga cell gamit ang PBS, centrifuge sa 6,000rpm sa 10 min, kolektaha ang pellet.
Escherichia coli: pagkolekta sa bakterya pinaagi sa centrifugation, hugasi kausa sa PBS, centrifuge sa 8,000rpm sa 5 min, ug kolektaha ang pellet.
2. Sampol nga Pagtambal
Pagtratar sa mga nakolekta nga cell pellets gamit ang lysis buffer sa ratio nga mass(g) sa volume(mL)1:(10-20), o pinaagi sa mekanikal o kemikal nga mga pamaagi sa yelo o sa room temperature (1g sa cell pellet adunay mga
109 nga mga selula).
3. Pagtambal sa Enzyme
Idugang ang 1-5mM MgCl sa sistema sa reaksyon ug i-adjust ang pH sa 8-9.
Idugang ang UltraNuclease sumala sa ratio sa 250 Units sa paghilis sa 1 g sa cell pellets, paglumlom sa 37 ℃ sulod sa sobra sa 30 minutos.Palihug tan-awa ang porma nga "Girekomenda nga Oras sa Reaksyon" aron mapili anggidugayon sa pagtambal.
4. Supernatant Koleksyon
Centrifuge sa 12,000 rpm sulod sa 30 minutos ug kolektahon ang supernatant.
Pahinumdom: Kung ang solusyon kay acidic o alkaline, o adunay taas nga konsentrasyon sa asin, mga detergent, odenaturants, palihog dugangi ang enzyme dosis o ipalugway ang panahon sa pagtambal sumala niana.
Girekomenda nga kahimtang sa reaksyonons
| Parameter | Optimal nga Kondisyon | Epektibo nga Kondisyon |
| Mg²+konsentrasyon | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatura | 37 ℃ | 0-42 ℃ |
| Konsentrasyon sa DTT | 0-100 mM | >0 mM |
| Konsentrasyon sa Mercaptoethanol | 0-100 mM | >0 mM |
| Konsentrasyon sa Monovalent Cation | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Konsentrasyon sa Phosphate | 0-10 mM | 0-100 mM |
Girekomenda Reaksyon Panahon (37 ℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Gidaghanon sa UltraNuclease (Katapusang Konsentrasyon) | Panahon sa Reaksyon |
| 0.25 U/mL | > 10 ka oras |
| 2.5 U/mL | >4h |
| 25 U/mL | 30 min |
Mubo nga sulat:
Palihug pagsul-ob sa gikinahanglan nga PPE, ingon nga lab coat ug gwantes, aron masiguro ang imong kahimsog ug kaluwasan!
