Rnase Inhibitor (walay gliserol)
Ang Murine RNase inhibitor usa ka recombinant murine RNase inhibitor nga gipahayag ug giputli gikan sa E.coli.Kini nagbugkos sa RNase A, B o C sa usa ka ratio nga 1: 1 pinaagi sa non-covalent bonding, sa ingon nagpugong sa kalihokan sa tulo ka mga enzyme ug nanalipod sa RNA gikan sa pagkadaut.Bisan pa, dili kini epektibo batok sa RNase 1, RNase T1, S1 Nuclease, RNase H o RNase gikan sa Aspergillus.Ang Murine RNase inhibitor gisulayan sa RT-PCR, RT-qPCR ug IVT mRNA, ug nahiuyon sa lainlaing komersyal nga Reverse transcriptases, DNA polymerases ug RNA polymerases.
Kung itandi sa mga inhibitor sa RNase sa tawo, ang murine RNase inhibitor wala’y duha nga mga cysteine nga sensitibo kaayo sa oksihenasyon nga hinungdan sa dili aktibo nga inhibitor.Nga naghimo niini nga lig-on sa ubos nga konsentrasyon sa DTT (ubos sa 1 mM).Kini nga bahin naghimo niini nga angayan gamiton sa mga reaksyon diin ang taas nga konsentrasyon sa DTT dili maayo sa reaksyon (eg Real-time nga RT-PCR).
Application
Kini nga produkto mahimong kaylap nga gigamit sa bisan unsang eksperimento diin ang pagpanghilabot sa RNase posible aron malikayan ang pagkadaot sa RNA, sama sa:
1.First-strand cDNA synthesis, RT-PCR, RT-qPCR, ug uban pa;
2. Panalipdi ang RNA gikan sa pagkadaot sa in-vitro transcription/translation (eg viral replication in vitro);
3.Pagpugong sa kalihokan sa RNase sa panahon sa pag-inusara ug pagputli sa RNA.
Mga Kondisyon sa Pagtipig
Tipigi ang -25～-15℃;
Mga siklo sa freeze-thaw ≤ 5 ka beses;
Balido sulod sa 1 ka tuig.
Kahubitan sa yunit
Ang usa ka yunit gihubit ingon ang kantidad sa RNase Inhibitor nga gikinahanglan aron mapugngan ang kalihokan sa 5 ng RNase A sa 50%.
Molekular nga gibug-aton
Ang RNase Inhibitor (Glycerol-free) usa ka protina nga 50 kDa.
Pagkontrol sa kalidad
Exonuclease Kalihokan:
Ang pagkubkob sa 40 U sa enzyme nga adunay 1 μg λ-Hind III nga paghilis sa DNA sulod sa 16 ka oras sa 37°C miresulta sa walay mamatikdan nga pagkadaot sa DNA nga gitino sa gel electrophoresis.
Kalihokan sa Endonuclease:
Ang pagkubkob sa 40 U sa enzyme nga adunay 1 μg λ DNA sulod sa 16 ka oras sa 37°C miresulta sa walay mamatikdan nga pagkadaut sa DNA nga gitino sa gel electrophoresis.
Nicking Kalihokan:
Ang pagkubkob sa 40 U nga enzyme nga adunay 1 μg pBR322 sulod sa 16 ka oras sa 37 ℃ miresulta sa walay mamatikdan nga pagkadaut sa DNA nga gitino sa gel electrophoresis.
RNase Kalihokan:
Ang pagkubkob sa 40 U sa enzyme nga adunay 1.6 μg MS2 RNA sulod sa 4 ka oras sa 37 ℃ miresulta sa walay makita nga pagkadaut sa RNA nga gitino sa gel electrophoresis.
E.coli DNA:
Ang 40 U sa Enzyme nakit-an sa TaqMan qPCR.Ang E.coli DNA kay ≤ 0. 1pg/40U.
Notes
1. Ayaw pag-uyog o pagkutaw nga kusog aron mapugngan ang pagpaaktibo sa enzyme.
Ang 2.RNase inhibitor aktibo sa temperatura gikan sa 25 ℃ ngadto sa 55 ℃ ug dili aktibo sa ≥65 ℃.
3. Ang kalihokan sa RNase H, RNase 1, ug RNase T1 dili pugngan.
4. Ang pH range alang sa pagpugong sa kalihokan sa RNase kay lapad (aktibo sa pH 5-9), nagpakita sa pinakataas nga kalihokan sa pH 7-8.
