2 × Rapid Taq Super Mix
Cat No: HCR2016A
Ang 2 × Rapid Taq Super Mix gibase sa giusab nga Taq DNA Polymerase, nagdugang kusog nga extension factor, amplification enhancement factor ug optimized buffer system, nga adunay super high amplification efficiency.Ang katulin sa amplification sa mga komplikadong templates sama sa genome sulod sa 3 kb moabot sa 1-3 sec/kb, ug kanang sa simple nga templates sama sa plasmids sulod sa 5 kb moabot sa 1 sec/kb.Kini nga produkto makadaginot pag-ayo sa oras sa reaksyon sa PCR.Sa samang higayon, ang mix naglangkob sa dNTP ug Mg2+, nga mapadako lamang pinaagi sa pagdugang sa mga primer ug templates, nga makapasayon usab sa mga lakang sa operasyon sa eksperimento.Dugang pa, ang mix adunay sulud nga electrophoretic indicator dye, nga mahimong direkta nga electrophoresis pagkahuman sa reaksyon.Ang ahente sa panalipod sa kini nga produkto naghimo sa pagsagol nga magpadayon nga lig-on nga kalihokan pagkahuman sa balik-balik nga pag-freeze ug pagtunaw.Ang 3'-end band A sa produkto sa PCR dali nga ma-clone sa T vector.
Mga sangkap
2 × Rapid Taq Super Mix
Mga Kondisyon sa Pagtipig
Ang mga produkto sa PCR Master Mix kinahanglan nga tipigan sa -25 ~ -15 ℃ sulod sa 2 ka tuig.
Mga detalye
| Detalye sa produkto | Rapid Taq Super Mix |
| Konsentrasyon | 2× |
| Init nga Pagsugod | Gitukod-sa Hot Start |
| Overhang | 3′-A |
| Katulin sa reaksyon | Paspas |
| Gidak-on (Katapusang Produkto) | Hangtod sa 15 kb |
| Mga kondisyon alang sa transportasyon | Dry ice |
Mga instruksyon
1. Sistema sa Reaksyon (50 μL)
| Mga sangkap | Gidak-on (μL) |
| Template DNA* | angay |
| Sa unahan nga primer (10 μmol/L) | 2.5 |
| Balikbalik nga primer (10 μmol/L) | 2.5 |
| 2 × Rapid Taq Super Mix | 25 |
| ddH2O | ngadto sa 50 |
2.Amplification Protocol
| Mga lakang sa siklo | Temperatura (°C) | Panahon | Mga siklo |
| Predenaturasyon | 94 | 3 min | 1 |
| Denaturasyon | 94 | 10 ka seg |
28-35 |
| Pag-ani | 60 | 20 ka seg | |
| Extension | 72 | 1-10 ka seg/kb |
Girekomenda nga paggamit sa lainlaing mga template:
| Uri sa template | Sakup sa paggamit sa segment (50 μL nga sistema sa reaksyon) |
| Genomic DNA o E. coli nga likido | 10–1,000 ng |
| Plasmid o viral DNA | 0.5-50 ng |
| cDNA | 1-5 µL (dili molapas sa 1/10 sa kinatibuk-ang gidaghanon sa reaksyon sa PCR) |
| Girekomenda nga paggamit sa lainlaing mga template | |
Mubo nga sulat:
1.Paggamit sa reagent: hingpit nga matunaw ug isagol sa dili pa gamiton.
2. Temperatura sa Annealing: Ang temperatura sa annealing mao ang unibersal nga Tm nga kantidad, ug mahimo usab nga ibutang nga 1-2 ℃ nga mas ubos kaysa sa primer Tm nga kantidad.
3. Katulin sa pagpalawig: Itakda ang 1 sec/kb para sa komplikadong mga templates sama sa genome ug E. coli sulod sa 1 kb;itakda ang 3 sec/kb alang sa komplikadong mga templates sama sa 1-3 kb genome ug E. coli;itakda ang 10 sec/kb para sa mga komplikadong templates sa 3 kb genome ug E. coli.Mahimo nimong itakda ang bili sa 1 sec/kb para sa usa ka simple nga template sama sa plasmid nga ubos sa 5 kb, 5 sec/kb para sa simple nga template sama sa plasmid tali sa 5 ug 10 kb, ug 10 sec/kb para sa simple nga template sama sa plasmid nga mas dako pa sa 10 kb.
Mga nota
1. Para sa imong kaluwasan ug panglawas, palihog pagsul-ob ug lab coat ug disposable gloves para sa operasyon.
2. Kini nga produkto alang lamang sa paggamit sa panukiduki!
