Rnase A
Ang Ribonuclease A(RNaseA) usa ka single-stranded polypeptide nga adunay 4 ka disulfide bond nga adunay gibug-aton nga molekular nga mga 13.7 kDa.Ang RNase A usa ka endoribonuclease nga espesipikong nagdaot sa usa ka stranded nga RNA sa mga nahabilin nga C ug U.Sa piho nga paagi, giila sa cleavage ang phosphodiester bond nga naporma sa 5'-ribose sa usa ka nucleotide ug ang phosphate nga grupo sa 3'-ribose sa kasikbit nga pyrimidine nucleotide, aron ang 2,3'-Cyclic phosphates ma-hydrolyzed sa katumbas nga 3 'nucleoside phosphates (pananglitan, pG-pG-pC-pA-pG gibuak sa RNase A aron makamugna pG-pG-pCp ug A-PG).Ang RNase A mao ang labing aktibo sa pagputol sa single-stranded RNA.Ang girekomendar nga konsentrasyon sa pagtrabaho mao ang 1- 100 μ G/mL, uyon sa lainlaing mga sistema sa reaksyon.Ang ubos nga konsentrasyon sa asin (0-100 mM NaCl) mahimong gamiton sa pagputol sa single-stranded RNA, double-stranded RNA, ug RNA chain nga naporma pinaagi sa RNA-DNA hybridization.
Bisan pa, sa taas nga konsentrasyon sa asin (≥0.3 M), ang RNase A espesipikong nagtangtang sa usa ka stranded nga RNA.
Ang RNase A kasagarang gigamit sa pagtangtang sa RNA atol sa pag-andam sa plasmid DNA o genomic DNA.Aktibo man o dili ang DNase sa panahon sa proseso sa pagpangandam dali nga makaapekto sa reaksyon.Ang tradisyonal nga pamaagi sa pagpabukal sa usa ka kaligoanan sa tubig mahimong gamiton aron dili maaktibo ang kalihokan sa DNase.Kini nga produkto walay DNase ug protease, ug wala magkinahanglan og init nga pagtambal sa dili pa gamiton.Dugang pa, kini nga produkto mahimo usab nga magamit sa mga eksperimento sa biology sa molekula sama sa pagtuki sa proteksyon sa RNase ug pagtuki sa pagkasunod-sunod sa RNA.
Mga kahimtang sa pagtipig
Ang produkto kinahanglan nga gitipigan sa -25 ℃ ~ - 15 ℃ sulod sa 2 ka tuig.
Mga detalye
| Panagway | Pulbos |
| Kadaghanon | 100mg / 1g |
| matang sa produkto | RNase A |
Mga instruksyon
Kini usa sa kasagarang mga pamaagi sa pag-andam sa solusyon sa pagtipig sa RNase A.Mahimo usab kini nga andamonpinaagi sa ubang mga pamaagi sumala sa tradisyonal nga mga pamaagi sa laboratoryo o reperensiya nga literatura (sama sadirekta nga dissolving sa 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 o Tris-NaCl solution)
1. Gamita ang 10 mM sodium acetate (pH 5.2) sa pag-andam sa 10 mg/mL sa RNase A storage solution.
2. Pagpainit sa 100 ℃ sulod sa 15 min.
3. Pabugnawon sa temperatura sa lawak, idugang ang 1/10 ka volume sa 1 M Tris-HCl (pH 7.4), i-adjust ang pH niini ngadto sa 7.4 (alang sapananglitan, idugang ang 500 mL sa 10 mg/mL RNase storage solution 1 M Tris-HCl, pH7.4).
4. Sub-packaged sa -20 ℃ alang sa frozen nga pagtipig, nga mahimong lig-on sulod sa 2 ka tuig.
[Nota]:
Kung nagbukal ang solusyon sa RNaseA ubos sa neyutral nga kondisyon, maporma ang pag-ulan sa RNase;Lutoa kini sa ubos nga pH, ug kung adunay ulan, kini mahimong maobserbahan, nga mahimong tungod sa presensya sa mga hugaw sa protina.Kung ang linugdang makit-an human sa pagpabukal, ang mga hugaw mahimong makuha pinaagi sa high-speed centrifugation (13000rpm), ug unya sub-packed alang sa nagyelo nga pagtipig.
Mga nota
Palihug pagsul-ob sa gikinahanglan nga PPE, ingon nga lab coat ug gwantes, aron masiguro ang imong kahimsog ug kaluwasan.
