Rnase A
Ang Ribonuclease A (RNaseA) usa ka single-stranded polypeptide nga adunay 4 ka disulfide bond nga adunay gibug-aton nga molekula nga mga 13.7 kDa.Ang RNase A usa ka endoribonuclease nga espesipikong nagdaot sa single-stranded RNA sa mga residu sa C ug U.Sa piho, ang cleavage nag-ila sa phosphodiester bond nga naporma sa 5′-ribose sa usa ka nucleotide ug ang phosphate nga grupo sa 3′-ribose sa kasikbit nga pyrimidine nucleotide, aron ang 2, 3′-Cyclic phosphates ma-hydrolyzed sa katumbas nga 3 'nucleoside phosphates (eg pG-pG-pC-pA-pG gipikas sa RNase A aron makamugna og pG-pG-pCp ug A-PG).Ang RNase A mao ang labing aktibo sa pagputol sa single-stranded RNA.Ang girekomenda nga konsentrasyon sa pagtrabaho mao ang 1-100μG / mL, nga nahiuyon sa lainlaing mga sistema sa reaksyon.Ang ubos nga konsentrasyon sa asin (0-100 mM NaCl) mahimong gamiton sa pagputol sa single-stranded RNA, double-stranded RNA, ug RNA chain nga naporma pinaagi sa RNA-DNA hybridization.Bisan pa, sa taas nga konsentrasyon sa asin (≥0.3 M), ang RNase A espesipikong nagtangtang sa usa ka stranded nga RNA.
Ang RNase A kasagarang gigamit sa pagtangtang sa RNA sa panahon sa pag-andam sa plasmid DNA o genomic DNA. Aktibo man o dili ang DNase atol sa proseso sa pagpangandam dali nga makaapekto sa reaksyon.Ang tradisyonal nga pamaagi sa pagpabukal sa usa ka kaligoanan sa tubig mahimong gamiton aron dili maaktibo ang kalihokan sa DNase.Kini nga produkto walay DNase ug protease, ug wala magkinahanglan og init nga pagtambal sa dili pa gamiton.Dugang pa, kini nga produkto mahimo usab nga magamit sa mga eksperimento sa biology sa molekula sama sa pag-analisa sa proteksyon sa RNase ug pagtuki sa pagkasunod-sunod sa RNA.
Mga Kondisyon sa Pagtipig
Ang produkto mahimong tipigan sa -25～-15℃, balido sulod sa 2 ka tuig.
Mga instruksyon
Kini usa sa kasagarang mga pamaagi sa pag-andam sa solusyon sa pagtipig sa RNase A.Mahimo usab kini nga andamon niubang mga pamaagi sumala sa tradisyonal nga mga pamaagi sa laboratoryo o reperensiya nga literatura (sama sadirekta nga dissolving sa 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 o Tris-NaCl solution)
1. Gamita ang 10 mM sodium acetate (pH 5.2) sa pag-andam sa 10 mg/mL sa RNase A storage solution
2. Pagpainit sa 100 ℃ sulod sa 15 min
3. Pabugnawon sa temperatura sa lawak, idugang ang 1/10 ka volume sa 1 M Tris-HCl (pH 7.4), i-adjust ang pH niini ngadto sa 7.4 (alang sapananglitan, idugang ang 500 ml sa 10g/ml RNase storage solution 1M Tris-HCL, PH7.4)
4. Sub-packaged sa -20 ℃ alang sa frozen nga pagtipig, nga mahimong lig-on hangtod sa 2 ka tuig.
[Notes]: Kung magbukal ang solusyon sa RNaseA ubos sa neyutral nga mga kondisyon, maporma ang RNase precipitation;Lutoa kini sa ubos nga pH, ug kung adunay ulan, kini mahimong maobserbahan, nga mahimong tungod sa presensya sa mga hugaw sa protina.Kung makit-an ang linugdang pagkahuman sa pagpabukal, ang mga hugaw mahimong makuha pinaagi sa high-speed centrifugation (13000rpm), ug dayon i-sub-pack alang sa pagtipig nga nagyelo.
Impormasyon sa Produkto
| Synonyms | Ribonuclease I;Pancreatic ribonuclease;Ribonuclease 3'-pyrimidnooligonucleotidohydrolase;Rnase A;Endoribonulcease I |
| CAS No. | 9001-99-4 |
| Panagway | Puti nga lyophilized powder |
| Molekular nga gibug-aton | ~ 13.7kDa (sunod-sunod nga amino acid) |
| Ph Bili | 7.6 (kalihokan 6-10) |
| Angayan nga Temperatura | 60 ℃ (Kalihokan range 15-70 ℃) |
| Pag-aktibo nga ahente | Na2+.K+ |
| Inhibitor | Rnase Inhibitor |
| Dili aktibo nga pamaagi | Dili ma-inactivate pinaagi sa pagpainit, gisugyot nga gamiton ang centrifuge column |
| Sinugdanan | Bovine |
| Pagkamatunaw | Matunaw sa tubig (10mg/ml) |
| Pagkawala sa uga | ≤5.0% |
| Kalihokan sa enzyme | ≥60 Kunitz nga mga yunit/mg |
| Isoelektrik nga punto | 9.6 |
Mga nota
Para sa imong kaluwasan ug panglawas, palihog pagsul-ob ug lab coat ug disposable gloves para sa operasyon.
