RT-LAMP Colormetric (Lyophilized nga bola)
Kini nga produkto adunay reaction buffer, RT-Enzymes Mix (Bst DNA polymerase ug heat-resistant reverse transcriptase), lyophilized protectants ug chromogenic dye components.Ang produkto kay lyophilized ball type, gamit lang sa primers ug templates.Kini nga kit naghatag usa ka paspas, tin-aw nga visual detection sa amplification, nga negatibo nga reaksyon gipakita sa pula ug positibo nga reaksyon gipakita pinaagi sa pagbag-o sa yellow.
Component
RT-LAMP Colormetric Master Mix (Lyophilized beads)
Mga aplikasyon
Para sa DNA o RNA isothermal amplification.
Mga Kondisyon sa Pagtipig
Gidala ug gitipigan sa 2 ~ 8 ℃.Ang produkto balido sulod sa 12 ka bulan.
Protokol
1.Kuhaa ang katugbang nga numero nga Lyophilized beads powder sumala sa gidaghanon sa mga pagsulay.
2.Pag-andam sa sagol nga reaksyon
Component | Tomo |
RT-LAMP Colormetric Master Mix (Lyophilized beads) | 1 ka piraso (2 beads) |
10 × Primer Mixa | 5 μL |
Mga template sa DNA/RNA b | 45 μL |
Mubo nga sulat:
1. 10×Primer Mix Concentration: 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B;
2. Ang mga template sa nucleic acid girekomendar nga matunaw gamit ang tubig sa DEPC.
3.I-incubate sa 65°C sulod sa 30-45mins, nga mahimong i-extend sa tukmang paagi sumala sa kausaban sa kolor Panahon sa reaksyon.
4.Sumala sa hubo nga mata, yellow ang positibo ug pula ang negatibo.
Mga nota
1.Ang temperatura sa reaksyon mahimong ma-optimize tali sa 62 ℃ ug 68 ℃ sumala sa kahimtang sa primer.
2.Ang giputos nga mga reagents kinahanglan dili ibutyag sa hangin sa dugay nga panahon.
3.Ang red ug yellow discoloration reaction nagdepende sa pH change sa reaction system, palihug ayaw gamita ang adunay sulod nga Tris nucleic acid storage solution, girekomenda nga gamiton ang ddH2O gitipigan nga nucleic acid.
4.Ang eksperimento ipahigayon sa usa ka standardized nga paagi, lakip ang pag-andam sa reaksyon nga sistema, sample treatment ug sample nga pagdugang.
5.Gisugyot nga andamon ang sistema sa reaksyon sa ultra-limpyo nga lamesa ug idugang ang mga template sa fume hood sa ubang mga kwarto aron malikayan ang sayup.