Usa ka Lakang RT-qPCR SYBR Green Premix
Cat No: HCB5140A
Ang One Step RT-qPCR Syber Green Premix kay para sa fluorescence quantification base sa SYBR Green I dye.Gamit ang gene-specific primers, reverse transcription ug qPCR reactions nakompleto sa usa ka tube, nga nagwagtang sa panginahanglan alang sa balik-balik nga cap-opening ug pipetting operations, pag-ayo pag-ayo sa assay efficiency ug pagkunhod sa risgo sa kontaminasyon.Para sa RNA sample, ang kit naggamit sa heat-resistant Reverse Transcriptase para sa episyente nga cDNA synthesis ug HotStart Taq DNA Polymerase para sa quantitative amplification.Ubos sa gi-optimize nga buffer system, ang pagkasensitibo sa kit mahimong ingon ka taas sa 0.1 pg alang sa gipahayag nga mga target ug ingon ka taas sa 1 pg para sa kasarangan nga gipahayag nga mga target.Ang kit mao ang angay alang sa amplification ug quantification sa DNA samples.Gitugotan niini ang sensitibo nga pag-ila ug pag-ihap sa mga nucleic acid gikan sa lainlaing mga sample sa tanum ug hayop, mga selula ug microorganism.
Mga sangkap
| No | Ngalan | Tomo | Tomo |
| 1 | Advanced nga Buffer | 250 μL | 2×1.25 mL |
| 2 | Advanced nga Enzyme Mix | 20 μL | 200 μL |
| 3 | Libre nga RNase H2O | 250 μL | 2×1.25 mL |
Mga Kondisyon sa Pagtipig
Kini nga produkto kinahanglan nga tipigan sa -25 ~ -15 ℃ gikan sa kahayag alang sa 1 ka tuig.
Mga instruksyon
1.Pag-configure sa sistema sa reaksyond
| Mga sangkap | Volume (μL) | Volume (μL) | Katapusan nga konsentrasyon |
| Advanced nga Buffer | 12.5 | 25 | 1 × |
| Advanced nga Enzyme Mix | 1 | 2 | - |
| Ipasa nga Primer (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| Balikbalik nga Primer (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| RNA Tamplateb | X | X | - |
| Libre nga RNase H2Oc | ngadto sa 25 | ngadto sa 50 | - |
Mubo nga sulat:
1) a.Tang katapusang primer nga konsentrasyon mao ang 0.2 μmol/L, nga mahimo usab nga i-adjust tali sa 0.1 ug 1μmol/L kon angay.
2) b.Ang reagent hilabihan ka sensitibo, nga adunay Total RNA sa han-ay sa 1pg-1μg, ug ang pagsulay sa mga sample sa tawo nagpakita sa usa ka kamalaumon nga input sa 1 pg-100 ng, pagkontrol sa usa ka kinatibuk-ang Ct nga kantidad sa han-ay sa 15-30 kung angay.
3) c.Kini girekomendar sa paggamit sa 20μL o 50μL sa pagsiguro sa balido ug reproducibility sa target gene amplification.
4) d.Palihug pag-andam sa ultra-clean nga bangko ug gamita ang nuclease residue-free tips ug reaction tubes;Girekomenda ang mga tip nga adunay mga cartridge sa filter.Likayi ang cross contamination ug aerosol contamination.
2.Programa sa reaksyon
| lakang sa siklo | Temp. | Panahon | Mga siklo |
| Balikbalik nga transkripsyon | 50 ℃a | 6mins | 1 |
| Inisyal nga denaturation | 95 ℃ | 5mins | 1 |
| Reaksyon sa amplification | 95 ℃ | 15 ka seg | 40 |
| 60 ℃b | 30 ka seg | ||
| Ang yugto sa pagtunaw sa kurba | Mga Default sa Instrumento | 1 | |
Mubo nga sulat:
1) a.Ang reverse transcription nga temperatura mahimong mapili tali sa 50-55°C sumala sa eksperimento nga mga panginahanglan.Para sa mga sample sa DNA, ang reverse transcription nga proseso mahimong tangtangon.
2) b.Sa mga espesyal nga kaso ang annealing/extension nga temperatura mahimong i-adjust sumala sa primer Tm value, 60°C ang girekomendar.
Mga nota
1. Kini nga produkto alang lamang sa paggamit sa panukiduki.
2. Palihug pag-opera gamit ang lab coat ug disposable gloves, para sa imong kaluwasan.
